Pentru microscopia cu fluorescență, proba emite lumină. Ce zici? Prin adăugarea de molecule de colorant la probă. Molecula de colorant este de obicei excitată atunci când absoarbe energia luminoasă, astfel încât eliberează orice energie captată sub formă de lumină. Energia luminoasă eliberată de o moleculă excitată are o lungime de undă mai mare decât lumina pe care o radiază. Moleculele de colorant sunt de obicei coloranți fluorescenți care au fluorescentă atunci când sunt expuși la o anumită lungime de undă a luminii. Imaginea formată este dintr-o etichetă de colorant fluorescent care emite lumină
Principiul din spatele acestui mecanism de lucru este că un microscop cu fluorescență expune un specimen la lumină ultravioletă sau ultravioletă sau la lumină albastră, formând astfel o imagine a specimenului emis de fluorescență. Au o lampă cu arc cu vapori de mercur care produce un fascicul intens de lumină care trece printr-un filtru de excitație. Funcția filtrului de excitație este de a transmite lungimi de undă specifice pe proba colorată cu colorant fluorescent, producând astfel o imagine a etichetei colorantului fluorescent.
După lentila obiectiv, există un filtru barieră al cărui scop principal este acela de a elimina orice radiație UV care poate fi dăunătoare luminii observatorului, reducând astfel contrastul imaginii.
Aplicatii aleMicroscopie cu fluorescență
Pentru vizualizarea agenților bacterieni precum Mycobacterium tuberculosis.
Folosit în tehnicile de imunofluorescență pentru a identifica anticorpi specifici produși împotriva antigenelor/patogenilor bacterieni prin marcarea anticorpilor cu coloranți fluorescenți.
Folosit în cercetarea ecologică pentru a identifica și observa microorganismele marcate cu coloranți fluorescenți
De asemenea, poate face diferența între bacteriile moarte și cele vii prin culoarea pe care o emit atunci când sunt tratate cu o pată specială
În plus față de microscoapele discutate mai sus, există un microscop mai puțin utilizat, numit microscopie de contrast cu interferență diferențială. Este foarte asemănător cu microscopia cu contrast de fază, în care imaginea este formată din razele de lumină deviate sau nedeviate. Diferența este că aici două fascicule de lumină sunt lansate asupra eșantionului și focalizate de o prismă. Un fascicul trece prin prismă pentru a ajunge la probă, în timp ce celălalt fascicul trece printr-o zonă transparentă a lamei fără eșantion. Cele două fascicule se îmbină apoi și interferează între ele pentru a forma o imagine. Poate fi folosit pentru a vizualiza structurile celulare ale specimenelor necolorate, cum ar fi endosporii, pereții celulari bacterieni, nucleele și granulele.
